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DNA碎片分析具體步驟是什么樣子的？3 個(gè)答案

答案 1：

就我知道的寫一點(diǎn)補(bǔ)充吧。不確定提問者的“DNA碎片”指的是什么，不知道從哪里開始講起。從犯罪現(xiàn)場(chǎng)收集來的各種DNA證據(jù)（血液，頭發(fā)，-等等大家都熟悉了）為的是能夠從中提取足夠多的DNA。根據(jù)能獲得的DNA的量不同，可能會(huì)采取不同的分析方法。建立DNA-Profile的基礎(chǔ)就是分析高度可變的重復(fù)序列，這種是在染色體上頻繁出現(xiàn)的“可變數(shù)目的重復(fù)序列 (VNTRs)[1] “，或者是”短重復(fù)序列 (STRs) [2] ”（算是VNTPs的一種），這些序列在不同人的身上以不同長度的組合出現(xiàn)，近親間會(huì)非常相似，但在無親緣關(guān)系的人之間幾乎不可能會(huì)相同。這就是鑒定的理論基礎(chǔ)。過程就是提取細(xì)胞核DNA，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (PCR)[3] 對(duì)STR部位的片段進(jìn)行指數(shù)級(jí)的擴(kuò)增，因?yàn)橹蟮碾娪緯?huì)將這些片段按大小分離開來，所以總量必須夠大以保證分離之后得到的片段被檢測(cè)到。電泳的原理 @米叔 已經(jīng)講了，記得在幾年前一個(gè)講座里聽過現(xiàn)在鑒證科用的都是以毛細(xì)管電泳[4]為基礎(chǔ)的儀器，就是可以在很細(xì)的導(dǎo)管里用高壓使片段分子迅速分離，而且包括加螢光染料最后檢測(cè)對(duì)比的過程都可以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。分離之后，通過同時(shí)比對(duì)多個(gè)STR位點(diǎn)，就會(huì)給出一個(gè)條帶圖譜，以及這樣的圖譜在整個(gè)種群中出現(xiàn)的幾率，然后從統(tǒng)計(jì)學(xué)上給出一個(gè)帶有相同圖譜的人出現(xiàn)的可能性?；旧先绻麑?duì)比8到15個(gè)這樣的位點(diǎn)，這個(gè)幾率就是幾百萬分之一。也就是說兩個(gè)沒有親緣關(guān)系的人幾乎不可能會(huì)有相同的STR圖譜。然后每個(gè)國家對(duì)建立和比對(duì)這種DNA-Profile都有不同的程序，在德國就是將取證得來的未知的DNA-Profile與已有罪犯及嫌疑人的數(shù)據(jù)庫對(duì)比，不過結(jié)果本身似乎也不能作為是否有罪的直接證據(jù)。另外也有其它方法來對(duì)DNA證據(jù)進(jìn)行分析，比方使用線粒體DNA。線粒體DNA簡單來說就是一套除了我們通常所說的23對(duì)染色體基因組之外，存在于我們每個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞器當(dāng)中的獨(dú)立的DNA。它的特點(diǎn)的拷貝數(shù)量大，所以在不能獲得足夠生物組織樣本的情況下可以使用。據(jù)說世貿(mào)大樓災(zāi)難里面的很多受難者都是通過這個(gè)方法確認(rèn)身份的。[1]en.-.org/wiki...[2]en.-.org/wiki...[3]en.-.org/wiki...[4] en.-.org/wiki...

答案 2：

提問者是想知道儀器分析的步驟嗎？還是只是想知道在做這件事的時(shí)候人都在干什么？我都簡單講講吧。感謝邀請(qǐng)?；蚪Y(jié)構(gòu)和序列梯子不同的DNA有不同的分子尺寸，我不確定，印象中電泳法是一種比較成熟的可以根據(jù)分子的尺寸來分離這些分子的方法。一塊玻璃板上涂上凝膠然后通低壓直流電，DNA樣本放在板子的負(fù)極上于是不同尺寸的分子就以不同的速度在凝膠上移動(dòng)（可參考z-i-u/question...）。分子是從負(fù)極向正極作直線運(yùn)動(dòng)的，于是樣本并列在一起，十幾個(gè)小時(shí)之后DNA碎片就分離了（這個(gè)時(shí)候-概可以去喝喝咖啡睡睡覺什么的，沒有條件親手實(shí)驗(yàn)，不敢亂說）。接下來就要考慮去測(cè)定那些個(gè)體碎片的位置，一般的方法是把凝膠浸入到一種溶液里面去，這種溶液能把雙股的DNA碎片分成單股（什么溶液沒記?。?，之后壓向一層塑料膜，單股碎片就被轉(zhuǎn)移到那膜上面去了。我們知道DNA是含有A、T、C、G四種堿基，經(jīng)過以上兩步之后現(xiàn)在這些可愛的小家伙們已經(jīng)在鏈上充分暴露，那么我們就可以使用探針來處理它們。一般這個(gè)過程被稱之為“標(biāo)記”。有一種探針是通過其他的途徑獲得的單股DNA小段，并被放射性原子所標(biāo)記過，探針里面的堿在片斷中找到它們的互補(bǔ)堿，然后再湊上去，和它們的“互補(bǔ)”混在一起。這一個(gè)步驟仍然是在膜上進(jìn)行的，然后我們把膜清洗一下貼到X光膠片上，探針的放射性在膠片上產(chǎn)生一種映像，就是我們很熟悉的膠片上的一些像條碼一樣的點(diǎn)和帶，每一條帶代表著一個(gè)碎段。并排的條帶，分子結(jié)構(gòu)相同。說到高興處，再說一點(diǎn)吧?！毕拗菩云伍L度多態(tài)性“簡稱”RFLP“，這是DNA的標(biāo)準(zhǔn)程序，在美國也被稱之為“DNA分型”，產(chǎn)生的結(jié)果更容易被分析。這種分析方法是沿著股束檢測(cè)一部分相同堿順序的系列，被稱為“同相重復(fù)序列可變數(shù)”，簡稱“VNTR”，這種神奇的技術(shù)被命名為“DNA指紋術(shù)”，它可以識(shí)別多重基因座的探針，分辨能力比單基因座方法強(qiáng)很多。但是RFLP的限制在于可供分析的樣本可能會(huì)很小，于是又出現(xiàn)了“PCR”也就是“聚合酶鏈反應(yīng)”這種技術(shù)，它能夠做的事非常重要——-。于是短時(shí)間內(nèi)就可以產(chǎn)生成百上千個(gè)，直到檢測(cè)人員擁有足夠用來分析的股束了！我們?cè)贑SI里看到的一些儀器，就是這個(gè)了。____________由于同專業(yè)是相關(guān)的以前研究過，具體已經(jīng)記不太清楚了，期待高人補(bǔ)充和解釋。

答案 3：

首先進(jìn)行DNA提取，這部分的步驟與《CSI》中所演的不同，劇集中簡化了。-/wiki...接著把提取的DNA扔進(jìn)全自動(dòng)分析儀就行了，你什么都不用干，無人值守式的全自動(dòng)，去喝杯咖啡，上會(huì)網(wǎng)，吃個(gè)飯，睡一覺，回來打印結(jié)果就行了，現(xiàn)在一般24小時(shí)內(nèi)就能搞定。

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